Autologna regeneracija tkiva Outin preparatom uključuje korištenje biološki aktivirane plazme pacijenta obogaćene nukleotidima DNA, što predstavlja “spremnik” faktora rasta otpuštenih iz krvnih pločica – trombocita. Metoda se koristi za:
- 1) obnovu kože i borbu protiv stresa
- 2) popravak staničnih oštećenja od UV zraka
- 3) liječenje ožiljaka i kožnih lezija (post akne)
- 4) photoaging
- 5) hipoksiju kože
- 6) kože prije i nakon menopauze
- 7) tretman protiv bora
- 8) optimizirani sjaj i svjetlinu kože
PRP-”VAMPIRE FACELIFT” – DEFINICIJA
PRP-“platelet-rich plasma“ ili plazma bogata trombocitima je vlastita krv pacijenta s povećanom koncentracijom trombocita koji svojom aktivacijom otpuštaju faktore (proteine) rasta, odnosno to je pripravak dobiven centrifugiranjem pune krvi kako bi se povećala koncentracija trombocita.
Krv: broj trombocita 150-350 x 10 9 u 1 mm3 krvi + antikoagulans.
PRP: meko centrifugiranje: 1000 okretaja kroz 5-6 minuta.
Prf: 1300-2700 okretaja kroz 8-12 minuta.
PRP znanstveni radovi
- metoda razvijena 1970-ih
- prvi put korištenja u Italiji 1987. godine (otvorena operacija srca)
- porast popularnosti sredinom 1990-ih
- broj recenziranih publikacija naglo se povećao od 2008.
- ukupno više od 5700 znanstvenih radova
Najčešće korišteni derivati krvi u kliničkoj upotrebi:
- trombocitima obogaćena plazma (prp): platelet rich plasma (krvna plazma bogata trombocitima)
- trombocitima obogaćeni čimbenici rasta (prgf)
- trombocitima obogaćen fibrin (prf)
- trombocitima i leukocitima obogaćena plazma (l-prp)
- trombocitima i leukocitima obogaćeni fibrin (l-prf), itd.
Trombociti – povijest otkrića
Kroz povijest, prije i poslije znanstvene revolucije, do današnjih dana, znanstvenici i prirodoznalci proučavali su trombocite što nam danas omogućuje da znamo puno o trombocitnoj strukturi, funkciji i uopće o životu trombocita. Otkrio ih je francuski liječnik Alfred Donne 1842. godine. Giulio bizzozera, 1882. godine postavio temeljne spoznaje o trombocitima koje su nakon njega bile potvrđivane. Proučavajući mikroskopski animalne vene, otkrio je da je oblik trombocita diskoidan te da nakon ozljede krvne žile u cirkulaciji započinje proces adhezije i agregacije: uloga u procesu hemostaze. Prvi je definirao trombocite kao središnje stanice sustava zgrušavanja. Bizzozero je prije otkrića trombocita identificirao i megakariocite u koštanoj srži koji su ujedno trombocitni prethodnici.
Prije 40-ak godina trombociti su smatrani prije svega stanicama zaduženim za hemostazu (zaustavljanje krvarenja).
Trombociti su krvne pločice tj. malena, bezbojna tjelešca bez jezgre. U litri krvi ih ima od 150–400 x109/1 mm3 krvi. Nastaju u koštanoj srži iz dijelova megakariocita (stanice s velikom jezgrom). Brzo se raspadaju: životni vijek im je od 3 do 7 dana.
Fotografija: slijeva nadesno: eritrocit, trombocit, leukocit
PRP koncentrira trombocite oko pet puta.
Što je to posebno u trombocitima?
Trombociti sadrže alfa granule koje sadržavaju veliku količinu faktora rasta i gusta tjelešca. Alfa granule se oslobađaju agregacijom i adherencijom trombocita na mjestu ozljede ili upale.
Bogatstvo granula u trombocitima
Najzanimljivije je svojstvo trombocita bogatstvo granula u kojima se nalazi veliki broj biomolekula, među kojima je i serotonin. Razlikujemo 3 vrste granula: αlfa-granule, guste granule koje su moćno skladište serotonina (engl. Dens granule) i lizosome. Od 90-ih godina prošlog stoljeća znanstvena istraživanja i tehnologije pokazala da trombocitne GRANULE sadrže obilje faktora rasta. Faktori rasta imaju ključnu ulogu u PROCESU CIJELJENJA I REGENERACIJE TKIVA. Faktori rasta potiču migraciju i umnažanje matičnih stanica.
Najzanimljivije je svojstvo trombocita bogatstvo granula u kojima se nalazi veliki broj biomolekula, među kojima je i serotonin. Razlikujemo 3 vrste granula: αlfa-granule, guste granule koje su moćno skladište serotonina (engl. Dens granule) i lizosome. Od 90-ih godina prošlog stoljeća znanstvena istraživanja i tehnologije pokazala da trombocitne GRANULE sadrže obilje faktora rasta. Faktori rasta imaju ključnu ulogu u PROCESU CIJELJENJA I REGENERACIJE TKIVA. Faktori rasta potiču migraciju i umnažanje matičnih stanica.
Shematski prikaz strukture trombocita
Faktori rasta
- čimbenik rasta porijeklom iz trombocita (PDGF)
- čimbenik rasta fibroblasta (FGF)
- transformirajući čimbenik rasta beta (TGF-β)
- inzulinu sličan čimbenik rasta 1 (IGF-1)
- inzulinu sličan čimbenik rasta 2 (IGF-2)
- čimbenik rasta vaskularnog endotela (VEGF)
- epidermalni čimbenik rasta (EGF)
- čimbenik rasta keratinocita (KGF, FGF7)
- čimbenik rasta vezivnog tkiva (CTGF, CCN2)
- interleukin 8 (IL-8)
PDGF (platelet-derived growth factor) -skupina polipeptida koja stimulira sintezu proteina – osobito kolagena te angiogenezu
TGF beta, EGF, VEGF stimuliraju angiogenezu i sintezu kolagena, staničnog matriksa, fibronektina
PDEGF (platelet-derived epidermal growth factor) stimulira proliferaciju keratinocita i fibroblasta
PDAF (platelet-derived angiogenesis factor) stimulira angiogenezu
IGF-1 stimulira sintezu elemenata staničnog matriksa i mitotsku aktivnost matičnih stanica
PF-4 (platlate factor 4) privlači fibroblaste
Aktivacija trombocita i oslobađanje faktora rasta je ono što ovu terapiju čini tako široko primjenjivom i interesantnom!
Koja je uloga faktora rasta?
KEMOTAKSIJA
- migracija stanica kao odgovor na kemijski podražaj
- matične stanice su “privučene” faktorima rastu i migriraju prema mjestu aplikacije
UMNAŽANJE STANICA
- značajno povećanje mitotske aktivnosti stanica
Učinak faktora rasta na tkiva
Neposredni (unutar 5 minuta)
- stimulacija drugih glasnika
- upalni odgovor
Rani (30min do 4 sata)
- povećanje ekspresije M-RNA , indukcija sinteze proteina
- kemotaksija (privlačenje stanica u regiju aplikacije)
Kasni (4-24 sata)
- povećanje mitotske aktivnosti fibroblasta
Odgođeni (do 3 mjeseca)
- remodeliranje tkiva
Ukupni učinak trombocitnih faktora rasta na tkiva
- međusobno složeno interferiraju s različitim učincima na stanice
- izazivaju niz biokemijskih reakcija i staničnih modifikacija dovodeći do brzog i dugotrajnog povećanje broja i aktivnosti fibroblasta
- moduliraju staničnu aktivnost koja dovodi do diobe i sazrijevanja matičnih stanica koja nije do kraja objašnjena
Indikacije za aplikaciju
- duboka rejuvenacija kože
- redukcija bora
- smanjenje vidljivosti ožiljaka
- akne (ožiljci)
- strije
- postpartalna opuštenost kože
- alopecija
- tretiranje celulita
Očekivani rezultati
- poboljšanje teksture i tonusa kože nakon 3 tjedna od aplikacije
- sinteza kolagena i remodeliranje kroz 3 mjeseca od aplikacije
Priprema plazme bogate trombocitima
Vađenje krvi
Klijentu se izvadi oko 10-15 ml krvi u epruvete napunjene s antikoagulansom (Na citrat).
Centrifugiranje
Krv se centrifugira na 1000 okretaja odnosno 300g tijekom 6 minuta, čime dolazi do razdvajanja krvi u 3 odjeljka: gornji i srednji “buffycoat” bogati trombocitima i leukocitima, i donji bogat eritrocitima.
Odvajanje trombocitima bogate plazme
Aktivacija trombocita
Aktivacija trombocita se provodi aktivatorom koji sadrži kalcijev klorid, adenin, citozin i tiamin
Aplikacija
Rezultat kondicioniranja krvi
Krv u prosjeku sadrži 2x 105 trombocita po mikrolitru a centrifugiranjem se dobiva plazma bogata trombocitima koja sarži do 5 puta veću koncentraciju trombocita
Metode aplikacije
Injekcijske tehnike (POVRŠINSKE I DUBOKE)
Papule: Površinska intradermalna tehnika, mjesto aplikacije je spoj epidermisa i dermisa
Nappage: Tehniku je osmislio Dalloz Bourguignon, aplikacija se vrši serijom injekcija na dubini od 2 do 4 mm održavajući konstatan pritisak u šprici koja se u kožu uvodi pod kutem od 30 do 60 stupnjeva
Point by point: Duboka intradermalna i hipodermalna tehnika na dubini od 4 mm i više
Mikroinekcijske tehnike (“derma roller” i “derma pen”)
Alfa granule i faktori rasta
Alfa granule otpuštaju faktore rasta cca 10 minuta nakon „aktivacije” trombocita. Održivost trombocita i oslobađanje faktora rasta u tkivo nastavlja se do kraja životnog vijeka trombocita. Uz to trombociti stimuliraju dotok makrofaga i matičnih stanica koje dodatno doprinose procesu obnove i regeneracije tkiva kroz uklanjanje degeneriranog i nekrotičnog tkiva, te potiču regeneraciju tkiva.
Faktori rasta potiču regenerativne procese: kemotaksiju, proliferaciju, diferencijaciju i angiogenezu.
PRF
PRP koncentrira trombocite oko pet puta.
PRF predstavlja noviju generaciju koncentrata trombocita.
Posebna tekstura PRF omogućuje kliničku upotrebu u amorfnom i membranskom obliku. Membranski oblik se koristi za pokrivanje i zaštititu velikih transplantata tkiva. Potiče osteogenezu i angiogenezu.
Prva promocija PRP-a
dr. M. Ferrari 1987:
Otvorena operacija srca i autologna transfuzija komponenta krvi kako bi se izbjegla primjena transfuzije homologne krvi, poslije operacije na otvorenom srcu.
Primjena od: ortopedije, sportske medicine, stomatologije, otolaryngologije, neurokirurgije, oftalmologije, urologije, zacjeljivanje rana, estetske medicine, kardiotorakalne i maksilofacijalne kirurgije.
PRP je autologni proizvod, uklonjena je mogućnost imunogene reakcije te prijenos zaraznih bolesti kao što su HIV te hepatitis.
PRP – dobrobit
- u primjeni i istraživanju od 1970.
- 1990. početak primjene u plastičnoj kirurgiji i kirurgiji lica i čeljusti
- potencijal cijeljenja mišića i tetiva uvodi ovu terapiju u ortopediju početkom 2000.
- PRP se počinje koristiti kao tretman tendinopatija u ranim 1990-im
U posljednje vrijeme dokumentirani blagotvorni učinci PRP-a na kronične nezacjeljujuće ozljede tetiva, ligamenata, mišića, kostiju (osteoartroze), degeneracije intervertebralnog diska, plantarne fasciopatije i degeneracije hrskavice kao i u skrbi mišićne traume te ishemijskih oštećenja živaca.
PRP – učinci
- tgf-β1 i tgf-β2 su uključeni u regeneraciju vezivnog tkiva i kosti
- potiču kemotaksiju fibroblasta i proizvodnju kolagena
- inhibiraju razgradnju kolagena smanjenjem aktivnosti proteaza i povećanjem aktivnosti njihovih inhibitora
- in vitro i in vivo istraživanja pokazala da TGF povećava proliferaciju mezenhimalnih matičnih stanica i osteoblasta
Čimbenik rasta koji se nalazi u plazmi bogatoj transformirajućim faktorom rasta – β (TGF- β) potiče:
- proliferaciju mezenhimalnih stanica
- regulira endotelnu, fibroblastičnu i osteoblastičnu mitogenezu
- regulira sintezu kolagena i izlučivanje kolagenaze
- regulira mitogene učinke drugih čimbenika rasta
- stimulira endotalnu kemotaksiju i angiogenezu
- inhibira proliferaciju makrofaga i limfocita
- faktor rasta fibroblasta (fgf) potiče rast i razlikovanje hondrocita i osteoblasta
- mitogenetika za mezenhimalne stanice, hondrocite i osteoblaste
- faktor rasta a i b (pdgf) koji potječe od trombocita za mezenhimalne stanice i osteoblaste
- stimulira kemotaksiju i mitogenezu u fibrilastim, glijalnim ili glatkim mišićnim stanicama
- regulira izlučivanje kolagenaze i sintezu kolagena
- stimulira makrofag i kemotaksiju neutrofila
- faktor epidermalnog rasta (egf) potiče endotalnu kemotaksiju ili angiogenezu
- regulira izlučivanje kolagenaze
- stimulira epitelialnu ili mezenhimalnu mitogenezu
- vaskularni endotelni faktor rasta (vegf) povećava angiogenezu i permeabilnost
- stimulira mitogenezu za endotelne stanice
- faktor rasta vezivnog tkiva (ctgf) potiče angiogenezu
- regeneracija hrskavice
- fibroze i adhezije trombocita
- inzulina kao faktor rasta (ilgf 1 i 2) za fibrblaste te stimulira sintezu proteina
PRP dobio pozornost u popularnim medijima kao rezultat uporabe u liječenju sportskih ozljeda kod profesionalnih sportaša:
Tiger Woods
Rođen kao Eldrick Tont Woods – američki igrač golfa. Smatra se jednim od najboljih igrača golfa svih vremena.
Raphael Nadal
Rafael “Rafa” Nadal Parera, profesionalni španjolski tenisač. Nadal je osvojio četrnaest Grand Slam naslova, zlatnu olimpijsku medalju 2008. i 28 naslova na turnirima iz serije Masters 1000 te je bio član španjolske Davis Cup momčadi koja je osvajala naslove 2004., 2008., 2009. i 2011. godine.
Kim Kardashian
“Vampire facelift”
Sigurnost uporabe
Hipoteza: prekomjerna ekspresija čibenika rasta i njihovih receptora povezana s nastankom tumora i displazije tkiva.
Čimbenici rasta reguliraju različite stanične procese, kao što su mitogeneza, kemotaksija, stanična diferencijacija i metabolizam. Neoplastični rast zahtijeva više kontinuirane doze čimbenika rasta tijekom duljeg vremena. Kod primjene PRP terapije izvanstanični čimbenici rasta razgrade se u roku od 7-10 dana.
Prednosti korištenja: Autologni PRP – bez rizika od unakrsne reaktivnosti – imuno reakcije ili prijenosa bolesti.
Prednosti PRP u udnosu na druge metode rejuvenacije
- koristi vlastite trombocite te je zbog toga rizik alergijskih reakcija minimalan
- pojačava sintezu kolgena kao odgovor na izlučivanje faktora rasta
- pojačava sintezu hijaluronske kiseline te količinu i gustoću ekstracelularnog matriksa
- idelan za one klijente koji ne žele sintetske filere
- oticanje, modrice i podljevi su značajno manje izraženi nego kod drugih metoda
- može se kombinirati s drugim metodama
- jednako je učinkovit kod muškaraca i žena
Kombiniranje s drugim metodama rejuvenacije
PRP se može kombinirati sa:
Filerima – Fileri dovode do trenutačnog povećanja volumena a injektiranje PRP iznad filera poboljšava teksturu i tonus kože te produžava djelotvornost filera za 3 do 6 mjeseci
Laserskom terapijom – Aplikacija PRP nakon laserske terapije značajno ubrzava oporavak i daje bolje konačne rezultate tretmana
Pilinzima – Ubrzava cijeljenje nakon primjene srednje dubokih pilina te poboljšava tonus i teksturu kože
Apsolutne kontraindikacije
- disfunkcija trombocita
- trombocitopenija
- hemodinamska nestabilnost
- septikemija
- aktivna infekcija u području aplikacije
- nesklonost klijenta da prihvati rizike
Relativne kontraindikacije
- upotreba NSAID 48 sati prije zahvata
- aplikacija kortikosteroida u području aplikacije unatrag mjesec dana
- sistemska upotreba kortikosteroida unatrag 2 tjedna
- febrilitet unatrag 14 dana
- neoplazme osobito hematopoetskog sustava
- HGB 10 g/dl
- koncentracija trombocita 105/ul
- kemoterapija
- hipofibrinogenemija
- antikoagulantna terapija
- kronične bolesti jetre
- sistemski lupus eritematozus
- porfirija
- alergije
- zloupotreba nikotinskih proizvoda i alkohola
Moguće nuspojave
- infekcija
- diskolaracije
- modrice
- bolnost u području aplikacije
Uvježbanost pripreme i aplikacije je ključ uspijeha
Kao i kod drugih terapija iscrpan trening i iskustvo najvažniji su preduvjeti za optimalan rezultat tretmana!